提取废水、粪便、肠内容物、生物固体病毒、细菌总核酸
产品特点
- 针对复杂样品——从废水、粪便、生物固体、肠道内容物等复杂样品中提取病毒、细菌DNA、RNA?
- 专利抑制因子去除技术(Inhibitor Removal Technology®)——去除包括多糖、脂类、亚铁血红素等PCR抑制因子,核酸可直接用于下游应用
- 可选的珠磨研磨——固体样品和细菌细胞选用玻璃研磨珠管裂解,提取液体样品病毒核酸无需珠磨研磨
描述
PowerViral® Environmental RNA/DNA Isolation Kit 专门设计用于快速简便提取富含PCR抑制因子的废水、粪便、生物固体、肠道内容物等环境样品中的病毒、细菌总核酸。专利的抑制因子去除技术(Inhibitor Removal Technology®)确保去除这类样品中的抑制因子,如肠内容物中未消化的植物残渣、裂解红细胞产生的亚铁血红素。最终洗脱到RNase-Free Water的DNA和RNA可直接用于PCR、cDNA合成或RT-qPCR等下游应用。
操作预览
粪便样品或含有固体物质的样品,需在珠磨研磨步骤使用0.1mm玻璃研磨珠套管加上加强型化学裂解缓冲液以保证顽固微生物的充分有效裂解。要提取水样或其它不需要打碎的样品的病毒核酸,可忽略珠磨研磨步骤,只要化学裂解即可。
若需要DNase消化处理,推荐使用DNase Max® Kit(货号:15200-50),创新地利用室温稳定的DNase酶有效去除基因组DNA。每次可在20min内消化30μg DNA,DNase酶使用专利树脂轻易去除。无需加热或EDTA灭活DNase。使用RTS DNase™ Kit,RNA性质保持稳定,仍维持原有质量。
研究与深入
A.
B.
C.
图1. 使用PowerViral® 环境RNA/DNA提取试剂盒获得高得率病毒核酸
MO BIO、Zymo和Qiagen的试剂盒分别从分子生物学级纯水(提取效率对照)、生物固体提取物、粪便悬液和1MDS滤膜浓缩地表水提取添加了log10 copies /ml(通过qPCR确定)的A)Ⅱ型腺病毒(AdV)、B)Ⅰ型脊髓灰质炎病毒(PV1)和C)噬菌体MS2(MS2)的结果比对。水平轴上每种基质环境样品分别加入三种病毒(水平轴1、2、3)。为了适应三款试剂盒上样量和洗脱体积的不同,原始加标病毒浓度通过qPCR数据计算并转换成log10 copies /ml。只有PowerViral® Environmental RNA/DNA Isolation Kit能检测出所有类型样品中的病毒核酸。数据由图森市亚利桑那大学的B. lker友情提供。
图2. PowerViral™ 环境RNA/DNA提取试剂盒提取的核酸含更少的抑制因子
往2.5μl核酸提取物中加入鼠诺如病毒质粒(pMNV)(1.0×105拷贝/PCR管)作为内参,通过qPCR分别检测三款试剂盒所提取的总核酸PCR抑制因子情况。每种不同基质环境样品(生物固体提取物、粪便悬液和1MDS滤膜浓缩地表水)的三个样品(水平轴1、2、3)都经过测试。只有PowerViral® Environmental RNA/DNA Isolation Kit在所有样品类型中提取效果都更好。数据由图森市亚利桑那大学的B. lker友情提供。
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规格
方法 |
硅胶离心柱型 |
细胞破碎 |
研磨珠破碎(可选) |
滤膜吸附能力 |
40μg每孔 |
液体样品处理量 |
200μl |
固体样品处理量 |
0.25g |
通量 |
1 - 24 个样 |
操作时间 |
45 分钟 |
仪器要求 |
涡旋混合仪及适配器
离心机 |
保存条件
室温保存2年。
- Iker, B.C., Bright, K.B., Pepper, I.L., Gerba, C.P., Kitajima, M. (2013). Evaluation of commercial kits for the extraction and purification of viral nucleic acids from environmental and fecal samples. Journal of Virological Methods, doi: 10.1016/j.jviromet.2013.03.011
试剂盒组分
组分
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28000-50
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Solution PV1
Solution PV2
Solution PV3
Solution PV4
Solution PV5
Solution PV6
Spin Filters
2.2ml Lysate Tubes
2ml Collection Tubes
Glass Bead Tubes,0.1mm |
32ml
11ml
32ml
2×30ml
30ml
5.5ml
50
50
200 含 |
产品介绍彩页
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