相关产品

强力土壤总RNA提取试剂盒
强力土壤DNA大量提取试剂盒
PowerMag® Soil（KingFisher®定制）*NEW
PowerLyzer™土壤DNA提取试剂盒
96孔板强力土壤DNA提取试剂盒
强力土壤DNA提取试剂盒
涡旋仪适配器（13000-V1-50适用）
涡旋仪(配合使用，提取效果更佳）

产品特点

• 强力裂解 - 采用优化的珠磨研磨方法，可高效裂解真菌、革兰氏阴性菌及革兰氏阳性菌细胞并溶解菌体总蛋白
• 快速简便提取总蛋白 - 新型离心柱方法提取蛋白质过程无需沉淀，全程仅需22 min
• 结果精确 -所得蛋白质可用于质谱分析、一维和二维电泳、以及其他蛋白组学相关应用

描述

NoviPure™ Soil Protein Extraction Kit专门设计用于所有类型土壤微生物胞外、胞内蛋白提取，不受腐殖质等干扰杂质影响。正在申请专利的双缓冲液提取法加上玻璃珠、陶瓷研磨珠能高效裂解细胞，并溶解所有胞外、胞内蛋白质。相对于SDS水煮、热蒸汽与NaOH结合等传统提取方法，最终蛋白沉淀非常干净不含杂质。加入缓冲液重悬蛋白沉淀后可用于进一步分析或保存。使用NoviPure™ Soil Protein Extraction Kit提取的蛋白质已经成功地在一维电泳和质谱分析法（2D LC-MS/MS）中使用。为保护珍贵样品，所有试剂及塑料制品都不含任何蛋白酶或蛋白。试剂盒说明书专门优化提取变性蛋白，要提取天然蛋白只需对操作流程进行少许修改即可。

研究与深入

图1：使用NoviPure™ Soil Protein Extraction Kit提取堆肥样品获得更干净的蛋白质

(A) NoviPure™ Soil Protein Extraction Kit试剂盒法（条带1、2）与蔗糖、苯酚提取法①（条带4、5）分别提取两个加入白念球菌（C. albicans)的5g预先灭菌堆肥样品总蛋白。NoviPure™ Soil Protein Extraction Kit（条带3）与蔗糖、苯酚法（6）再提取白念球菌（C. albicans）纯培养作为对照。

（B） NoviPure™ Soil Protein Extraction Kit试剂盒法（条带1、2）与SDS煮沸提取法（条带3、4）分别提取两个加入大肠杆菌（E. coli)的5g预先灭菌堆肥样品总蛋白。

每样取20μl总蛋白跑一维SDS-PAGE电泳，Stain Free凝胶成像系统③可视化处理。NoviPure™ Soil Protein Extraction Kit所获得的蛋白背景清晰无拖尾，可见蛋白条带。可见腐殖质等干扰杂质非常少。

图2：使用NoviPure™ Soil Protein Extraction Kit提取复杂类型土壤样品获得高蛋白质得率

使用NoviPure™ Soil Protein Extraction Kit提取加入了大肠杆菌（E. coli）的5g预先灭菌土壤及沉积物的总蛋白。每样取20μl总蛋白跑一维SDS-PAGE电泳，Stain Free凝胶成像系统③可视化处理。所有样品都能获得清晰蛋白条带，并与大肠杆菌纯培养阳性对照相符。（条带1、2）- 淡水湖沉积物；（3、4）- 泻湖沉积物；（5、6）- 沙滩沙子；（7、8）- 大田土壤；（9、10）- 大肠杆菌纯培养。

图3：使用NoviPure™ Soil Protein Extraction Kit提取的蛋白质在二维凝胶电泳中获得成功结果

使用NoviPure™ Soil Protein Extraction Kit提取加入了大肠杆菌（E. coli）的5g预先灭菌土壤及沉积物的总蛋白。每样取20μl总蛋白，pH3-10 二维SDS-PAGE电泳后银染分析。可见蛋白质清晰可见无腐殖质等干扰物。

图4：使用NoviPure™ Soil Protein Extraction Kit提取的蛋白质在2D LC - MS/MS中获得精确的结果

蛋白质质谱峰图。为强阳离子交换分离后的一部分。由NoviPure™ Soil Protein Extraction Kit 提取5g加入E. coli灭菌堆肥的总蛋白，胰蛋白酶酶解成肽段，再对这些肽段用2D-MS/MS进行鉴定与分析。原色谱比对SWISSPRO数据库（最新版本2013年5月）。结果鉴定出1076种不同蛋白。

①Taylor & Williams, 2013 Microb. Ecol. 59:390-99

②Chourey et al. 2010 J. Proteome Res. 9:6615-22

③BIORAD mini PROTEAN® TGX Stain-Free™ Gels

规格

提取方法	专利申请中的双缓冲液提取法
细胞破碎	研磨珠破碎
处理样品量	2-5g
仪器要求	涡旋混合仪 适配器(50ml) 50ml 管离心机(4500×g） 小型离心机（20000×g）

保存条件

室温（15-30℃）保存。SP1和SP2溶液使用前先冷藏。

试剂盒组分

组分	30000-20
NoviPure™ Bead Tubes Solution SP1 Solution SP2 50ml Falcon™ Collection Tubes 1.7ml Low-Protein Binding Tubes	20 500ml 32ml 40 20

产品介绍彩页