如何在酶解DNA时保护好你的RNA

核酸提取过程中DNA酶解步骤是引起RNA降解或丢失的最常见原因之一。酶解反应一般在硅胶离心柱上进行，这对离心柱式核酸提取来说是一种节省时间的好方法，但对富含DNA的样品而言就不那么有效率了（比如脾脏，胸腺，甚至某些土壤样品），这种情况下，需要在溶液中对DNA进行酶解。

经典的DNA酶解程序最后一步涉及加EDTA或者加热灭活酶，这两种方式都会影响RT-PCR结果：EDTA会抑制RT-PCR酶的活性，加热会导致RNA完整性受损。另外，大部分DNA酶需要冷冻保存并且多管分装以避免多次冻融降低酶活性。

我们推出了一套能全程保护RNA的酶解体系：DNase Max

DNase Max：是一种可在室温下稳定保存的高活性（1ul酶能在20分钟内消化30ugDNA）DNA酶溶液。最强大的部分是清除DNA酶这一步。DNA酶和阳离子被一种强特异性的树脂吸附而从RNA样品中清除，无需添加酶抑制剂或者加热，终产物可直接用于qRT-PCR。与竞争性试剂盒比较，该树脂非常高效，单次反应能完全去除10个单位DNA酶（如下图，3-4泳道），而竞争试剂盒仅能去除2单位DNA酶（如下图，1-2泳道）。

这意味着几个小时的工作过程中你都能很好的保护你的珍贵RNA，最终得到更准确的基因表达分析结果。

DNase Max去除树脂完全去除DNA酶

RNA样品分别由DNase Max™ 试剂盒和竞争对手的试剂盒进行DNA消化以及DNase去除。操作严格按照官方说明书进行。通过MO BIO 的DNase-free认证办法，对DNase残留活性进行分析。条带5为阴性对照，不使用DNase。所有样品37℃孵育1h，65℃ 5min灭活。1%琼脂凝胶电泳展示如图，DNase Max去除树脂成功地去除掉所有DNase（条带3-4），而竞争对手产品的树脂并不能完全去除样品中的所有DNase（条带1-2）。

保护RNA的其他产品

无论什么来源的样品，RNA的提取从来都是不容易的，尤其是样品有限或者不可替代的时候。因为RNA不稳定，所以操作小心快速很关键。有很多方法可以在操作中保护起到RNA的作用，使你操作起来更加轻松而不必焦虑。

用BME、均匀快速地研磨和使用带清除树脂并且经认证不含RNA酶的DNA酶将成为你成功提取任意样品RNA的小技巧。此外，要去除工作台和设备上的核酸酶，应用实验室清洁喷雾（12095）十分有效，经认证不含RNA酶的手套（1556）的使用也能提供极大的帮助，在我们的实验室，这些都是必不可少的。